Ацетилирование MITF по K206. вестерн-блоттинг с использованием антител против ацетиллизина или анти-GFP иммунопреципитированного MITF, меченного GFP, коэкспрессируемого с CBP, p300 или GCN5 в клетках Phoenix-AMPHO, как указано. АкК; Ацетил-лизин. Этот эксперимент был повторен 3 раза с аналогичными результатами. b Схематично показано расположение сайтов ацетилирования MITF (красный), обнаруженных в этом исследовании, и AcK206, выделенных синим цветом. Ацетилированные пептиды, полученные в результате масс-спектрального анализа, указаны ниже, а сайты фосфорилирования и мотив связывания p300 указаны выше. c Выравнивание аминокислот в основной области родственных членов семейства bHLH-LZ. Желтый цвет выделяет высококонсервативные остатки, а красный цвет (соответствует K206 в MITF) указывает на лизины, консервативные только в подсемействе MiT. d Изображение сокристаллической структуры MITF-DBD-ДНК, подчеркивающее взаимодействие K206-фосфатного остова. Мономеры MITF изображены красным или зеленым цветом, а ДНК — синим. Фото: Nature Communications (2023 г.). DOI: 10.1038/s41467-023-41793-7
Транскрипционный фактор, ассоциированный с микрофтальмией (MITF), является главным регулятором развития пигментных клеток и, как онкоген выживания линии, играет решающую роль в меланоме рака кожи и ее резистентности к терапии. То, как MITF различает свою, казалось бы, несовместимую дифференцировку и связанные с пролиферацией цели в геноме, остается загадкой. <р> <р>Пакаварин Луфразиттифол из Людвига Оксфорда, Колин Годинг и его коллеги обнаружили, что способность MITF связывать ДНК ингибируется опосредованным CBP/p300 ацетилированием его остатка лизина 206, которое преимущественно направляет его связывание с элементами ДНК, участвующими в дифференцировке. Это позволяет объяснить, почему мутация этого остатка — K206Q — связана с синдромом Ваарденбурга, который часто характеризуется дефектами пигментации волос, кожи и глаз.
Результаты, опубликованные в Nature Communications, также показывают, что более 40% молекул MITF прочно связаны с ДНК в ядре, а время пребывания составляет более 100 секунд — по сравнению с лишь несколькими секунд для большинства факторов транскрипции. Это делает MITF сравнимым с репрессором транскрипции CTCF и полисотовым репрессивным комплексом 1 (PRC1) и предполагает, что он может играть сходные роли в установлении и поддержании организации хроматина, специфичной для линии меланоцитов.
Дополнительная информация: Пакаварин Луфраситтифол и др., Ацетилирование перепрограммирует целевую селективность и время пребывания MITF, Nature Communications (2023). DOI: 10.1038/s41467-023-41793-7
Информация журнала: Nature Communications
Предоставлено Ludwig Cancer Research
